熒光定量PCR擴(kuò)增區(qū)相對較小，約200bp，通常以cDNA為模板。如果不注意引物的設(shè)計(jì)，很可能落在同一個(gè)外顯子上。此時(shí)，cDNA和基因組DNA將發(fā)出相同的信號，即出現(xiàn)定量誤差。如果引物與內(nèi)含子交叉，c

熒光定量PCR擴(kuò)增區(qū)相對較小，約200bp，通常以cDNA為模板。如果不注意引物的設(shè)計(jì)，很可能落在同一個(gè)外顯子上。此時(shí)，cDNA和基因組DNA將發(fā)出相同的信號，即出現(xiàn)定量誤差。如果引物與內(nèi)含子交叉，cDNA會發(fā)出信號，而基因組DNA會發(fā)出信號，因?yàn)槔碚撋弦锏拇嬖?，不需要?nèi)部參照。絕對定量是計(jì)算基因在基因組中的拷貝數(shù)。如果是計(jì)算基因組中某個(gè)基因的拷貝數(shù)，建議絕對量化單拷貝基因組合，否則，結(jié)果很難理解，如果是設(shè)計(jì)定量PCR引物，可以參考網(wǎng)頁鏈接