western blot轉(zhuǎn)膜的時候膜上的marker很明顯。膜的背面基本上都能看見條帶？蛋白質(zhì)標記最初是與染料共價偶聯(lián)的純化蛋白質(zhì)混合物。對凝膠運行和膜傳遞有一定的參考價值。蛋白標記帶在膜上是完整的，

western blot轉(zhuǎn)膜的時候膜上的marker很明顯。膜的背面基本上都能看見條帶？

蛋白質(zhì)標記最初是與染料共價偶聯(lián)的純化蛋白質(zhì)混合物。對凝膠運行和膜傳遞有一定的參考價值。蛋白標記帶在膜上是完整的，說明蛋白已經(jīng)轉(zhuǎn)移了，其他樣品蛋白都是一樣的，不用擔心。另外，如果你的目標蛋白質(zhì)是大分子，看看你的蛋白質(zhì)凝膠里有沒有標記物殘留，如果蛋白質(zhì)凝膠上的300kDa帶轉(zhuǎn)移到PVDF膜上，這個標記物殘留量通常很大，根本就沒有問題。我們把它關上。解決這一問題的方法有兩種：一種是增加標記器的樣本量；另一種是更換標記器。顯影時，如果用帶CCD攝像機的儀器讀取結果，靶條讀取化學發(fā)光信號，標記器用亮場分別拍攝；如果用膠片壓片，顯影定影時，需要提前標記。希望對你有所幫助

做western blot時，蛋白轉(zhuǎn)到膜上了，但是marker看不到，為什么marker沒轉(zhuǎn)上呢？

可能的原因是半干法轉(zhuǎn)移膜時，造模劑加入量小，緩沖液加入量過多，造模劑保存不好。如果在室溫下長時間分解，也可能是電泳凝膠運行的問題。電壓越小，膠帶越分散，但制造商不清楚。