taqman探針法pcr 定量PCR法中,Taqman探針法需要做溶解曲線嗎?為什么?
定量PCR法中,Taqman探針法需要做溶解曲線嗎?為什么?在SYBR-green法中,利用染料在DNA斷裂時(shí)不發(fā)出熒光,而與DNA雙鏈結(jié)合時(shí)發(fā)出熒光的原理繪制溶解曲線。在PCR反應(yīng)中,TaqMan探
定量PCR法中,Taqman探針法需要做溶解曲線嗎?為什么?
在SYBR-green法中,利用染料在DNA斷裂時(shí)不發(fā)出熒光,而與DNA雙鏈結(jié)合時(shí)發(fā)出熒光的原理繪制溶解曲線。在PCR反應(yīng)中,TaqMan探針的寡核苷酸鏈被DNA聚合酶的核酸外切酶活性切斷,因此不能重新組合形成探針。另外,溶解曲線僅為判斷反應(yīng)體系中是否存在非特異性擴(kuò)增提供了一個(gè)側(cè)面依據(jù),適用于染色法。然而,探針法具有很高的特異性,在這方面不需要