做WB時羊抗鼠二抗的稀釋比例一般是多少？一般根據(jù)抗體的特異性和親和力。第一抗體的濃度范圍比較大，從1:200到1:1000，需要多次測定。第二抗體的稀釋比為1:5000～1:10000。流式抗體與普通

做WB時羊抗鼠二抗的稀釋比例一般是多少？

一般根據(jù)抗體的特異性和親和力。第一抗體的濃度范圍比較大，從1:200到1:1000，需要多次測定。第二抗體的稀釋比為1:5000～1:10000。

流式抗體與普通做WB抗體有哪些區(qū)別，如何選擇？

謝謝。除了抗原抗體反應原理，似乎沒有其他類似的地方。

流式細胞儀可以根據(jù)抗原或抗體對細胞進行計數(shù)。這是一個高成本的定量實驗。并不是每個實驗室或醫(yī)院都能做到這一點，結果是定性或半定量的，準確性和敏感性一般。如果抗體不好或操作水平不好，就會出現(xiàn)很多雜帶，不易分析。

做wb時，一抗和二抗?jié)舛仁窃趺创_定的？怎么設置抗體滴度？

第一抗體的量與樣品中目標分子的含量有關。如果含量高，就不必用太多抗體，以免浪費，而且條帶太亮，無法分析。建議使用廠家的抗體濃度（宜橋神州將提供抗體劑量和自然細胞系檢測結果）。如果樣品與制造商的細胞不同，您可以嘗試上下探索一個或兩個濃度梯度；

可以使用第二抗體的劑量和您實驗室的常規(guī)劑量。如果效果不理想，可以根據(jù)陰性對照通過陽性試驗檢測第二抗體的效果，以及其他人使用的效果，看是否有問題。

WB孵二抗，孵錯了,還能重孵嗎? 本來是鼠抗孵成兔抗？

理論上，我還沒試過。不管怎樣，這是錯誤的。你不妨嘗試一下，或者用條帶緩沖液洗一下，再加一個新的