為什么QPCR引物設(shè)計(jì)在跨外顯子的接頭區(qū)？提取RNA時(shí)，它可能與DNA混合。當(dāng)進(jìn)行PCR時(shí)，引物可能與DNA結(jié)合。如果設(shè)計(jì)的引物跨越兩個(gè)外顯子，它們就不會(huì)與DNA結(jié)合。因?yàn)樵贒NA中，外顯子通常由內(nèi)含

為什么QPCR引物設(shè)計(jì)在跨外顯子的接頭區(qū)？

提取RNA時(shí)，它可能與DNA混合。當(dāng)進(jìn)行PCR時(shí)，引物可能與DNA結(jié)合。如果設(shè)計(jì)的引物跨越兩個(gè)外顯子，它們就不會(huì)與DNA結(jié)合。因?yàn)樵贒NA中，外顯子通常由內(nèi)含子分開。然而，在轉(zhuǎn)錄的mRNA中，內(nèi)含子被切斷，外顯子連接在一起。因此，用這種方法設(shè)計(jì)的引物可以避免與DNA結(jié)合，只與RNA結(jié)合。我們避免基因組擴(kuò)增。當(dāng)然，為了避免基因組擴(kuò)增，我們也可以用DNA酶來處理RNA，破壞可能存在的DNA。這樣，底漆的設(shè)計(jì)就不重要了。

qpcr買試劑盒還要設(shè)計(jì)引物嗎？

QPCR與普通PCR相同，需要緩沖液、dNTP、Taq酶、引物、模板、水，QPCR試劑盒是將緩沖液、dNTP、Taq酶混合在一起，也需要引物和模板。引物可以添加到綠色人口的官方帳戶和免費(fèi)熒光定量PCR引物由專業(yè)人士提供。

怎么設(shè)計(jì)擴(kuò)全長(zhǎng)的引物？

1. 確定siRNA的設(shè)計(jì)位點(diǎn)是否具有特異性

2。你正在研究的基因是否有多個(gè)拼接

3。qPCR的引物是否設(shè)計(jì)在全長(zhǎng)蛋白的剪接上

如果siRNA的設(shè)計(jì)位點(diǎn)在亞型A上，而檢測(cè)到的蛋白是由亞型B表達(dá)的，則qPCR的結(jié)果可能與蛋白表達(dá)的變化不一致。