用綠色熒光蛋白（GFP）來反映RNA干擾（RNAi）載體的轉(zhuǎn)染效率，從而研究RNAi載體的抑制作用。它最早是在植物研究中發(fā)現(xiàn)的，后來在線蟲研究中更為深入。其研究成果于2006年獲得諾貝爾獎（安德魯·法

用綠色熒光蛋白（GFP）來反映RNA干擾（RNAi）載體的轉(zhuǎn)染效率，從而研究RNAi載體的抑制作用。它最早是在植物研究中發(fā)現(xiàn)的，后來在線蟲研究中更為深入。其研究成果于2006年獲得諾貝爾獎（安德魯·法爾和克雷格·梅洛）。簡單的過程是，雙鏈RNA分子被一類稱為Dicer的酶切割成小RNA分子（~35nt），然后與幾種蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物。激活后，它們能特異性地結(jié)合到靶mRNA上進(jìn)行降解。表觀遺傳學(xué)又稱表觀遺傳學(xué)，是近年來研究的熱點(diǎn)。與經(jīng)典的遺傳學(xué)研究不同，基因功能的研究是在不改變核苷酸序列的情況下進(jìn)行的。簡言之，研究從DNA到蛋白質(zhì)過程中可逆的和遺傳的變化。最典型的是DNA修飾和組蛋白修飾，因?yàn)檫@些不同的修飾會導(dǎo)致基因沉默或表達(dá)改變。RNAi可以看作是表觀遺傳學(xué)的一部分。RNAi是mRNA水平的調(diào)節(jié)，沒有DNA序列的改變，有很多內(nèi)源性RNAi，很多還在研究中。如你所知，我希望能有所幫助。參考文獻(xiàn)來自維基百科。

在RNAi實(shí)驗(yàn)中,GFP干擾組的作用是什么？

RNAi是指由與靶基因同源的雙鏈RNA誘導(dǎo)的特異性轉(zhuǎn)錄后基因沉默。

作用機(jī)制是dsRNA被特定核酸酶降解，產(chǎn)生小干擾RNA（siRNA）。這些siRNAs與同源靶RNA互補(bǔ)結(jié)合，通過特異酶降解靶RNA，抑制和下調(diào)基因表達(dá)。

當(dāng)外源基因如RNA干擾編輯病毒基因、人工轉(zhuǎn)移基因和轉(zhuǎn)座子隨機(jī)整合到宿主細(xì)胞基因組中并由宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)錄時，通常會產(chǎn)生一些dsRNA。

什么是rnai干擾?其作用機(jī)制是什么？

可能是RNA與基因組DNA混合。這樣，在進(jìn)行PCR時，如果基因完全不表達(dá)，結(jié)果是DNA混合在一起，PCR就可以給出結(jié)果。但這條帶不是來自RNA。這是DNA污染，干擾PCR結(jié)果。RNA可以被提取出來，然后用DNA酶處理，分解可能混入其中的DNA。合理設(shè)計底漆也可以避免。即使存在DNA混合，用這種方法設(shè)計的引物也只能擴(kuò)增RNA，而不能擴(kuò)增DNA。這就要求引物應(yīng)該設(shè)計成能夠穿過外顯子連接。因?yàn)镈NA中基因的外顯子和內(nèi)含子是分開的，而RNA中的內(nèi)含子是被切斷的，外顯子是連在一起的。剩下的，如果你想去的話，是接近結(jié)果的

正義引物可以作為上游引物，反義引物可以作為下游引物，這是RNA干擾中常用的。這兩個引物大部分是互補(bǔ)的。