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熒光定量PCR擴(kuò)增區(qū)相對較小,約200bp,通常以cDNA為模板。如果不注意引物的設(shè)計,很可能落在同一個外顯子上。此時,cDNA和基因組DNA將發(fā)出相同的信號,即出現(xiàn)定量誤差。如果引物與內(nèi)含子交叉,cDNA會發(fā)出信號,基因組DNA也會發(fā)出信號,因為如果沒有信號就不能完全匹配,可以避免基因組DNA的影響