cDNA的結(jié)構(gòu)？CDNA是具有與RNA鏈互補(bǔ)的堿基序列的單鏈DNA的簡稱，即互補(bǔ)DNA，或由這條DNA鏈和具有互補(bǔ)堿基序列的DNA鏈形成的DNA雙鏈。與RNA鏈互補(bǔ)的單鏈DNA是在適當(dāng)?shù)囊锎嬖谙?，?/p>

cDNA的結(jié)構(gòu)？

CDNA是具有與RNA鏈互補(bǔ)的堿基序列的單鏈DNA的簡稱，即互補(bǔ)DNA，或由這條DNA鏈和具有互補(bǔ)堿基序列的DNA鏈形成的DNA雙鏈。與RNA鏈互補(bǔ)的單鏈DNA是在適當(dāng)?shù)囊锎嬖谙?，通過RNA依賴的DNA聚合酶(逆轉(zhuǎn)錄酶)的作用合成的，單鏈cDNA合成后，通過堿處理去除相應(yīng)的RNA，然后以單鏈cDNA為模板，通過DNA依賴的DNA聚合酶或RNA依賴的DNA聚合酶的作用合成雙鏈cDNA。真核生物的RNA或其他RNA的cDNA廣泛用于基因工程。在這種情況下，mRNA的cDNA與沒有內(nèi)含子的原始基因的DNA(基因組DNA)不同；相反，對應(yīng)于mRNA 3’端聚腺苷酸序列的核苷酸序列(在原始基因中沒有發(fā)現(xiàn))與外顯子序列、前導(dǎo)序列和后續(xù)序列一起反映了mRNA的結(jié)構(gòu)。

pcr為什么要形成cdna？

因?yàn)橹挥性赾dna形成后，才能進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。只有變成cdna，引物才能結(jié)合，P才能產(chǎn)生想要的產(chǎn)物。

部分基因文庫指的是什么？

部分基因文庫是指：如果這個文庫包含了某種生物的全部基因，那么這個基因文庫就叫做基因組文庫。

如果這個文庫只包含一個生物體的部分基因，這個基因文庫就稱為部分基因文庫，如cDNA文庫。首先獲得mRNA，然后逆轉(zhuǎn)錄cDNA形成文庫。

重組DNA技術(shù)可用于將某一生物細(xì)胞的總DNA或染色體DNA的所有片段隨機(jī)連接到基因載體上。

cdna技術(shù)理論依據(jù)？

許多真核轉(zhuǎn)錄激活因子由物理上和功能上獨(dú)立的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域BD和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域AD組成。因此，可以構(gòu)建各種基因和AD的融合表達(dá)載體。當(dāng)在酵母中作為融合蛋白表達(dá)時，可以根據(jù)報告基因的表達(dá)篩選具有與靶元件特異性結(jié)合區(qū)域的蛋白質(zhì)。

理論上，在單雜交檢測中，任何靶元件都可以用于篩選具有特定結(jié)合區(qū)域的蛋白質(zhì)。

rt-pcr是什么檢測方法？

RT -PCR是逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)。原理是：從組織或細(xì)胞中提取總RNA，以其mRNA為模板，然后用Oligo(dT)或隨機(jī)引物通過逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。然后，cDNA被用作PCR擴(kuò)增的模板，以獲得目的基因或檢測基因表達(dá)。RT-PCR將RNA檢測的靈敏度提高了幾個數(shù)量級，使得分析一些極小的RNA樣品成為可能。該技術(shù)主要用于分析基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，獲取目的基因，合成cDNA探針，構(gòu)建高效的RNA轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。

rt-pcr是什么檢測方法？

RT-PCR簡介

RT-PCR是一種將RNA的逆轉(zhuǎn)錄(RT)與cDNA的聚合酶鏈擴(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先用逆轉(zhuǎn)錄酶從RNA合成cDNA，然后以cDNA為模板擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR技術(shù)靈敏、應(yīng)用廣泛，可用于檢測基因表達(dá)水平、細(xì)胞內(nèi)RNA病毒含量以及直接克隆特定基因的cDNA序列。作為模板的RNA可以是體外轉(zhuǎn)錄的總RNA、mRNA或RNA產(chǎn)物。不管用哪種RNA，關(guān)鍵是保證RNA不受RNase和基因組DNA污染。使用天威時代公司的總RNA提取系統(tǒng)(如目錄號DP405、DP406)，獲得的RNA純度高，基因組DNA污染小，用于RT-PCR系統(tǒng)時可獲得滿意的結(jié)果。用于逆轉(zhuǎn)錄的引物可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體條件從隨機(jī)引物、寡dT和基因特異性引物中選擇。對于沒有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的短真核細(xì)胞mRNA，三種都可以。