半光切片什么意思？電子顯微鏡超薄切片技術(shù)中的一種定位方法。即光鏡切片因?yàn)榭梢员〉?.5~2μm，所以也叫半薄切片，是電子顯微鏡超薄切片技術(shù)中一種有效的定位方法。半薄切片(厚度0.6~0.8μm)的制備

半光切片什么意思？

電子顯微鏡超薄切片技術(shù)中的一種定位方法。

即光鏡切片因?yàn)榭梢员〉?.5~2μm，所以也叫半薄切片，是電子顯微鏡超薄切片技術(shù)中一種有效的定位方法。半薄切片(厚度0.6~0.8μm)的制備是目前常用的樣品制備方法。由于半薄切片圖像的清晰度和分辨率比石蠟切片好得多，視野也比超薄切片大，有利于獲得高質(zhì)量的光鏡圖像。

切片技術(shù)有那些？

根據(jù)切片厚度，可分為半薄片和超薄切片。

半薄切片主要有冰凍切片、石蠟切片和樹(shù)脂切片，用于光鏡和熒光顯微鏡下觀察。

超薄切片主要是將樣品用包埋液包埋聚合后切片，得到厚度為70-100nm的切片，可用于透射電鏡下觀察，檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)。

超薄切片為什么要進(jìn)行電子染色?與光學(xué)顯微鏡的染色相比有何區(qū)別？急？

電子染色是利用重金屬鹽對(duì)超薄切片進(jìn)行染色，用于電鏡觀察，以增強(qiáng)樣品的對(duì)比度的一種染色方法。

重金屬可以增強(qiáng)電子散射，不同的結(jié)構(gòu)由于染色程度不同，散射強(qiáng)度也不同，在電鏡下呈現(xiàn)出不同的明暗對(duì)比。光學(xué)染色是通過(guò)可見(jiàn)光的透射來(lái)觀察物體，通過(guò)染料著色來(lái)區(qū)分物體的不同成分或組織和性質(zhì)。一般來(lái)說(shuō)，前者是增加電子束的分辨力，后者是增加可見(jiàn)光的分辨力。

TEM的功能？

透射電子顯微鏡廣泛應(yīng)用于材料科學(xué)和生物學(xué)。由于電子容易被物體散射或吸收，穿透力較低，樣品的密度和厚度會(huì)影響最終的成像質(zhì)量，因此需要制備更薄的超薄切片，一般為50 ~ 100 nm。所以透射電鏡觀察的樣品需要處理的很薄。常用的方法有:超薄切片法、冷凍超薄切片法、冷凍蝕刻法、冷凍斷裂法等。對(duì)于液體樣品，通常掛在經(jīng)過(guò)預(yù)處理的銅網(wǎng)上進(jìn)行觀察。

羅伯特森的實(shí)驗(yàn)說(shuō)明了什么？

1959年，J. D. Robertson通過(guò)超薄切片技術(shù)獲得了細(xì)胞膜的清晰圖片。在電子顯微鏡下，他觀察到細(xì)胞膜的暗-亮-暗三層結(jié)構(gòu)，厚約7.5nm，由內(nèi)外表面的雙脂質(zhì)分子和蛋白質(zhì)組成。

他提出了 "單元膜模型及應(yīng)用；"，認(rèn)為連續(xù)的脂質(zhì)雙分子層構(gòu)成膜的主體，磷脂的非極性端朝向膜的內(nèi)側(cè)，極性端朝向膜的外側(cè)，蛋白質(zhì)通過(guò)靜電作用與磷脂的極性端結(jié)合，形成蛋白質(zhì)-磷脂-蛋白質(zhì)的三層結(jié)構(gòu)，稱為單位膜。

單元膜模型的主要不足是將生物膜的結(jié)構(gòu)描述為靜態(tài)不變的，這與膜功能的多樣性相矛盾。