主要區(qū)別在于重組元件和基因標(biāo)記的表達(dá)。啟動子和終止子被宿主識別。真核生物可能需要增強(qiáng)子，如果重組進(jìn)基因組，就需要介導(dǎo)重組的序列。大多數(shù)篩選標(biāo)記是不同的。在宿主中以質(zhì)粒形式存在的真核表達(dá)載體可以被復(fù)制。

主要區(qū)別在于重組元件和基因標(biāo)記的表達(dá)。啟動子和終止子被宿主識別。真核生物可能需要增強(qiáng)子，如果重組進(jìn)基因組，就需要介導(dǎo)重組的序列。大多數(shù)篩選標(biāo)記是不同的。

在宿主中以質(zhì)粒形式存在的真核表達(dá)載體可以被復(fù)制。哺乳動物細(xì)胞中沒有質(zhì)粒，外源基因整合到基因組中，無法擴(kuò)增。通過集成多個(gè)站點(diǎn)產(chǎn)生多個(gè)副本。

如果載體被重組，它不會。;沒關(guān)系，它 ■都是一樣的酶消化和連接。細(xì)菌轉(zhuǎn)化也是如此。細(xì)菌中也可以加入真核載體。

如果表達(dá)，一般是通過ISPG直接轉(zhuǎn)化細(xì)菌表達(dá)，表達(dá)的蛋白通常以包涵體或分泌蛋白的形式存在。如果這種蛋白來源于真核基因，可能不具備相應(yīng)的蛋白生物活性，因?yàn)樵吮磉_(dá)缺乏真核轉(zhuǎn)錄后的蛋白修飾機(jī)制。然而，原核表達(dá)的蛋白質(zhì)易于純化，并且易于獲得純化的蛋白質(zhì)用作免疫原。

而真核表達(dá)則是通過脂質(zhì)體或

瞬時(shí)表達(dá)，即瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后的初始階段，質(zhì)?；駾N段在細(xì)胞內(nèi)是游離的，可以表達(dá)，稱為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染表達(dá)。隨后有兩種馴化的質(zhì)?；駾N段游離在細(xì)胞中，一種是降解的，另一種是插入染色體中并能持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)的。

在載體選擇方面，可以不使用篩選標(biāo)記進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá)，如NEO抗G418，但也可以使用穩(wěn)定表達(dá)載體進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá)。

植物瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)

當(dāng)外源基因?qū)胫参锛?xì)胞時(shí)未來有兩種表達(dá)瞬時(shí)表達(dá)和穩(wěn)定表達(dá)。在瞬時(shí)表達(dá)狀態(tài)的基因轉(zhuǎn)移中，導(dǎo)入細(xì)胞的外源DNA和宿主細(xì)胞的染色體DNA不整合。一般這些DNA在載體進(jìn)入細(xì)胞后12小時(shí)內(nèi)即可表達(dá)，持續(xù)時(shí)間約80小時(shí)。在穩(wěn)定表達(dá)狀態(tài)的基因轉(zhuǎn)移中，導(dǎo)入宿主細(xì)胞的DNA整合到細(xì)胞的染色體DNA中，以永久形式存在，并能遺傳給后代，形成穩(wěn)定的轉(zhuǎn)化細(xì)胞?；?qū)敕椒煞譃殚g接轉(zhuǎn)基因方法和直接轉(zhuǎn)基因方法。